精氨酸支原體PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素

精氨酸支原體PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

人核心蛋白聚糖ELISA檢測試劑盒
人核因子E2相關(guān)因子2ELISA檢測試劑盒
人核因子κBELISA檢測試劑盒
人核因子κB受體活化因子ELISA檢測試劑盒
人核因子κB受體活化因子配基ELISA檢測試劑盒
人核因子κB抑制蛋白αELISA檢測試劑盒
人黑皮質(zhì)素ELISA檢測試劑盒
人黑色素瘤分化相關(guān)基因5ELISA檢測試劑盒
人黑色素瘤相關(guān)抗原1ELISA檢測試劑盒
人黑色素細(xì)胞刺激素ELISA檢測試劑盒
人黑色素細(xì)胞抗體ELISA檢測試劑盒
人痕量胺關(guān)聯(lián)受體6ELISA檢測試劑盒
人橫紋肌輔肌動蛋白αELISA檢測試劑盒
人紅細(xì)胞轉(zhuǎn)酮酶ELISA檢測試劑盒
人呼吸道合胞病毒抗原ELISA檢測試劑盒
人胡蘿卜素ELISA檢測試劑盒
人花生四烯酸ELISA檢測試劑盒
人環(huán)孢素AELISA檢測試劑盒
人環(huán)磷酸鳥苷ELISA檢測試劑盒
人環(huán)磷酸腺苷ELISA檢測試劑盒
人環(huán)氧合酶1ELISA檢測試劑盒
人環(huán)氧合酶2ELISA檢測試劑盒
人環(huán)指蛋白180ELISA檢測試劑盒
人環(huán)指蛋白213ELISA檢測試劑盒
人緩激肽ELISA檢測試劑盒
人緩激肽受體B2ELISA檢測試劑盒